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標題:顯微鏡熒光光度計量的原理-主要的優(yōu)點有哪些

信息分類:站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時間:2014-5-5 15:42:15 將本頁加入收藏

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正文:

顯微鏡熒光光度計量的原理-主要的優(yōu)點有哪些


    顯微鏡熒光光度術(microfluorophotometry)又稱細胞熒光光度術(cyto
f luorophotometry)或定量熒光顯微術(quantitative fluorescence micro
scopy)。顯微鏡熒光光度是在光學顯微鏡的分辨水平上進行熒光的定量和定
性分析。它的主要優(yōu)點是:在顯微鏡下測定低濃度的反應產(chǎn)物,靈敏度比吸
收法高104次方。由于熒光物質(zhì)本身就是發(fā)射的光源,因此在測定不均一分
布的發(fā)色團時,不存在分布誤差的問題,所以測定方法簡單;但由于存在熒
光消褪和熒光碎滅問題,測量也存在些特殊問題。


    1.測定細胞內(nèi)化學成分的含量:用熒光定量DNA, RNA、組蛋白、總蛋白
、精氨酸、賴氨酸、糖元和疏基,主要是利用特定的熒光染料與被測定物質(zhì)
進行特異性的結(jié)合,并在一定的濃度范圍內(nèi)呈化學計量學關系,從而可根據(jù)
熒光強度來測定物質(zhì)的含量,

    2.免疫熒光的定最測定:視覺半定盤的方法只有在熒光強度相差2倍時,
才能判斷出來,而利用細胞熒光光度計則能測出細微的熒光變化。

    4.酶的動力學研究:細胞熒光光度術特別適用于活細胞或沒有固定的組
織切片酶的動力學研究,例如通過測定還原型輔酶I結(jié)合到蛋白質(zhì)的熒光變
化來分析氧化酶體系的變化。

    5.微體積的顯微熒光光度測定:免疫化學和酶化學研究常需要測定包含
在微滴、微毛細管或人工基質(zhì)微球中微小體積的熒光反應產(chǎn)物。細胞熒光光
度計能準確的測定直徑為1-50微米大小“微池”中的熒光。











出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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