室內(nèi)空氣中總細菌數(shù)檢測方法

步驟

（一）采樣時應將采樣器置于平臺處，不可以人員手持采樣器方式進行采樣，以避免采樣人員本身造成的污染。采樣器應置于距離地面約120至150公分之高度。應紀錄采樣時采樣器流速、采集時間和收集空氣樣品之體積等，并同時記錄采樣點環(huán)境之溫度及溼度。

（二）采樣時將含培養(yǎng)基之培養(yǎng)皿放置于采樣器內(nèi)，設定抽取適當量之空氣體積，以衝擊方式將生物氣膠微粒收集到培養(yǎng)基上，最佳量之菌落數(shù)為25 – 250個菌落之間，但抽吸時間不可超過10分鐘，以免造成微生物因脫水過度而無法培養(yǎng)。采樣皆需進行二重複，采樣后應于24小時內(nèi)送至實驗室并培養(yǎng)。設備空白樣品應將含培養(yǎng)基之培養(yǎng)皿置入采樣器內(nèi)，置放時間與樣品采樣時間相同，但不進行抽氣。

（三）進行下一個采樣前，需再以70%酒精擦拭采樣器放置培養(yǎng)皿之部位后，才能進行下一次的采樣。

（四）采樣后將培養(yǎng)皿置于30±1℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48±2小時。

（五）檢測人員應具備區(qū)別細菌和真菌之能力（如觀察菌落特征或進行革蘭氏染色等），或選用五（一）2.所述之添加環(huán)己亞胺的胰蛋白大豆瓊脂培養(yǎng)基，以使總細菌數(shù)之計數(shù)更為正確。

（六）計數(shù)各培養(yǎng)皿中所產(chǎn)生的細菌菌落，并記錄之。若菌落太多或雜菌菌落數(shù)太多造成判讀困難，則以”菌落太多無法計數(shù)”（Too numerous to count；TNTC）表示。

八、結(jié)果處理

（一）二重覆的兩個培養(yǎng)皿細菌菌落數(shù)相加計算其平均值。惟使用單（多）階多孔洞采樣器（Single or Multi-stage multi-orifice sampler）之菌落數(shù)計算方式，應于完成菌落計數(shù)后，參照采樣器原制造廠商提供之校正表（positive hole correction table）先行換算，再計算其平均值。

（二）平均值除以采樣時所抽取之總空氣體積(需以采樣前后之平均流量求取總空氣體積)，得到一立方公尺空氣中總細菌數(shù)的濃度，單位以CFU/m3（colony forming unit/cubic meter）表示。

（三）檢測紀錄須注明采樣時間、培養(yǎng)起始及終了時間、培養(yǎng)基名稱、培養(yǎng)溫度等。

九、品質(zhì)管制

（一）微生物采樣人員及檢測人員應具備微生物基本訓練及知識。

（二）進行微生物檢測時，所用的盛裝器具均應經(jīng)滅菌處理。

（三）每次采樣時，應進行運送空白。每批次需進行一次設備空白。空白樣品經(jīng)培養(yǎng)后均不得檢出。

（四）每個采樣點需至少進行二重複。

（五）培養(yǎng)基需保存于4± 2℃，保存期限不得超過14天。

（六）采樣器需進行采樣前之流量校正及采樣后之流量量測，所測得之流量前后差異不得超過±10%。且流量校正器需經(jīng)定期一年校正一次。