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標(biāo)題:固定到切片觀察細(xì)胞內(nèi)部細(xì)微結(jié)構(gòu)分析電子顯微鏡

信息分類(lèi):站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時(shí)間:2017-4-12 17:27:21 將本頁(yè)加入收藏

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正文:

固定到切片觀察細(xì)胞內(nèi)部細(xì)微結(jié)構(gòu)分析電子顯微鏡

  一般電鏡觀察要求切出400~700A(埃)的薄片,這樣才能被電子柬
穿透而成像。針對(duì)以上兩點(diǎn),采取了許多技術(shù)革新措施,主要有:采用
較為柔和、能更好保存細(xì)胞細(xì)微特征的戊二醛、鋨酸,代替酒精、醋酸
等作為固定劑;以環(huán)氧樹(shù)脂或水溶性樹(shù)脂代替石蠟作為包埋劑;以熱膨
脹操縱系統(tǒng)或微機(jī)操縱系統(tǒng)裝備切片機(jī),以實(shí)現(xiàn)精確的半薄或超薄切片
的目的;在刀具革新上以玻璃刀或鉆石刀代替石蠟切片機(jī)的金屬刀,以
適應(yīng)切削堅(jiān)硬的樹(shù)膠塊;等等。可見(jiàn),在由固定到切片的全過(guò)程中,儀
器、試劑與操作方法都不斷做出了根本性的革新。

  常規(guī)的超薄切片為電鏡觀察提供了有力的樣品制作前提,然而并非
十全十美,還有不少不足之處。前文講過(guò),免疫細(xì)胞化學(xué)要求最大限度
地保存細(xì)胞中的抗原,在這一點(diǎn)上,快速冰凍方法比化學(xué)處理方法遠(yuǎn)為
優(yōu)越;即使為了觀察細(xì)胞內(nèi)部細(xì)微結(jié)構(gòu)的自然狀態(tài),也是以愈少經(jīng)受化
學(xué)處理愈好。為此,相繼發(fā)明了各種冰凍處理技術(shù),例如冰凍固定、冰
凍置換、低溫包埋、冰凍切片、冰凍斷裂、冰凍刻蝕等等,其中有的用
于制作厚切片,有的用于制作半薄切片,有的用于制作超薄切片,而且
各有各的樣品制作程序和特殊用途,不一而足











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