標(biāo)題：生物的連續(xù)培養(yǎng)-細(xì)胞生物量的測(cè)定圖像顯微鏡
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2017-3-19 19:13:10
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正文:
細(xì)胞生物量的測(cè)定
微生物生長(zhǎng)不僅表現(xiàn)在數(shù)量增多，也表現(xiàn)在質(zhì)量增加，也可通
過(guò)測(cè)定微生物質(zhì)量的變化釆研究其生長(zhǎng)；最直接的方法是測(cè)定細(xì)胞
干重：首先離心收集液體培養(yǎng)物中的細(xì)胞，然后洗滌細(xì)胞，之后將
細(xì)胞置于烤爐烘干稱重。稱干重法尤其適用于測(cè)定真菌的生長(zhǎng)，但
此方法費(fèi)時(shí)，而且不夠靈敏。對(duì)細(xì)菌而言，由于細(xì)胞個(gè)體重量很小
，至少需要離心幾百毫升的培養(yǎng)物才能得到足夠的量用于測(cè)定。
光線照射到細(xì)胞上會(huì)發(fā)生散射，而且細(xì)胞個(gè)體在大小上基本一
致，所以光散射的程度與細(xì)胞濃度呈正比，人們可利用光比濁法測(cè)
定微生物生長(zhǎng)，該方法更為迅速、敏感。當(dāng)細(xì)度濃度達(dá)到10的7次
方個(gè)／mL時(shí)，培養(yǎng)基就會(huì)呈現(xiàn)輕微的混濁，濃度進(jìn)一步提高，濁度
增加，能透過(guò)的光線就越少。光散射程度可用分光光度計(jì)監(jiān)測(cè)，在
低吸光值范圍內(nèi)，吸光值與細(xì)胞濃度呈線性關(guān)系，只要細(xì)胞濃度達(dá)
到能產(chǎn)生可測(cè)定的濃度時(shí)，就可很容易地利用分光光度計(jì)比濁法測(cè)
定微生物的生長(zhǎng)。
如果某物質(zhì)在各細(xì)胞中的含量一樣，細(xì)胞構(gòu)造中這種物質(zhì)的總
量就與總的微生物細(xì)胞的生物量直接相關(guān)。例如，從一定體積培養(yǎng)
物中收集細(xì)胞，洗滌后測(cè)定總蛋白質(zhì)量或總氮量，蛋白質(zhì)量越高，
表明培養(yǎng)物中微生物生物量越多。與此類似，測(cè)定葉綠素含量可檢
測(cè)藻類數(shù)量，而ATP的含量可用來(lái)估計(jì)活的微生物的生物量。
微生物的連續(xù)培養(yǎng) 濁度與微生物生物量測(cè)定．通過(guò)測(cè)定吸
光值可以確定微生物生物量，當(dāng)細(xì)胞數(shù)量增加導(dǎo)致濁度升高寸，更
多的光線發(fā)生散射，通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)得的吸光值增加：分光光度
汁有兩組刻度，底下刻度為吸光值，頂上刻度為透光率，吸光值增
加時(shí)透光率下降；
微生物的連續(xù)培養(yǎng)
以上討論了在封閉系統(tǒng)進(jìn)行的分批培養(yǎng)，即不補(bǔ)充新的營(yíng)養(yǎng)物
質(zhì)，也不排除產(chǎn)生的廢物，對(duì)數(shù)期僅維持幾代就進(jìn)人穩(wěn)定期。若在
一個(gè)開(kāi)放系統(tǒng)中培養(yǎng)微生物，在培養(yǎng)過(guò)程中不斷補(bǔ)充新的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
并排出廢物，使該系統(tǒng)環(huán)境條件保持恒定，這個(gè)系統(tǒng)就稱為連續(xù)培
養(yǎng)系統(tǒng)(continuous culture system)，在該系統(tǒng)中，微生物的生
長(zhǎng)可保持在對(duì)數(shù)期，生物量濃度在較長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)保持恒定。恒化器
常用的連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)主要有 (1)恒化器(chemostat)和(2)恒
濁器(turbidostat)。利用恒化器進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng)時(shí)，向培養(yǎng)容器中
加入無(wú)菌新鮮培養(yǎng)基的速度與排出含菌培養(yǎng)物的速度相同，培養(yǎng)基
中某種必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(如某種氨基酸)的濃度控制在限定范圍，這樣
，系統(tǒng)內(nèi)微生物生長(zhǎng)速度由新鮮培養(yǎng)基加入系統(tǒng)的速度決定，最終
細(xì)胞濃度依賴于限制性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)更新的速度以稀
釋率
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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