標題：生物的連續(xù)培養(yǎng)-細胞生物量的測定圖像顯微鏡
信息分類:站內新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2017-3-19 19:13:10
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正文:
細胞生物量的測定
微生物生長不僅表現在數量增多，也表現在質量增加，也可通
過測定微生物質量的變化釆研究其生長；最直接的方法是測定細胞
干重：首先離心收集液體培養(yǎng)物中的細胞，然后洗滌細胞，之后將
細胞置于烤爐烘干稱重。稱干重法尤其適用于測定真菌的生長，但
此方法費時，而且不夠靈敏。對細菌而言，由于細胞個體重量很小
，至少需要離心幾百毫升的培養(yǎng)物才能得到足夠的量用于測定。
光線照射到細胞上會發(fā)生散射，而且細胞個體在大小上基本一
致，所以光散射的程度與細胞濃度呈正比，人們可利用光比濁法測
定微生物生長，該方法更為迅速、敏感。當細度濃度達到10的7次
方個／mL時，培養(yǎng)基就會呈現輕微的混濁，濃度進一步提高，濁度
增加，能透過的光線就越少。光散射程度可用分光光度計監(jiān)測，在
低吸光值范圍內，吸光值與細胞濃度呈線性關系，只要細胞濃度達
到能產生可測定的濃度時，就可很容易地利用分光光度計比濁法測
定微生物的生長。
如果某物質在各細胞中的含量一樣，細胞構造中這種物質的總
量就與總的微生物細胞的生物量直接相關。例如，從一定體積培養(yǎng)
物中收集細胞，洗滌后測定總蛋白質量或總氮量，蛋白質量越高，
表明培養(yǎng)物中微生物生物量越多。與此類似，測定葉綠素含量可檢
測藻類數量，而ATP的含量可用來估計活的微生物的生物量。
微生物的連續(xù)培養(yǎng) 濁度與微生物生物量測定．通過測定吸
光值可以確定微生物生物量，當細胞數量增加導致濁度升高寸，更
多的光線發(fā)生散射，通過分光光度計測得的吸光值增加：分光光度
汁有兩組刻度，底下刻度為吸光值，頂上刻度為透光率，吸光值增
加時透光率下降；
微生物的連續(xù)培養(yǎng)
以上討論了在封閉系統(tǒng)進行的分批培養(yǎng)，即不補充新的營養(yǎng)物
質，也不排除產生的廢物，對數期僅維持幾代就進人穩(wěn)定期。若在
一個開放系統(tǒng)中培養(yǎng)微生物，在培養(yǎng)過程中不斷補充新的營養(yǎng)物質
并排出廢物，使該系統(tǒng)環(huán)境條件保持恒定，這個系統(tǒng)就稱為連續(xù)培
養(yǎng)系統(tǒng)(continuous culture system)，在該系統(tǒng)中，微生物的生
長可保持在對數期，生物量濃度在較長時期內保持恒定。恒化器
常用的連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)主要有 (1)恒化器(chemostat)和(2)恒
濁器(turbidostat)。利用恒化器進行連續(xù)培養(yǎng)時，向培養(yǎng)容器中
加入無菌新鮮培養(yǎng)基的速度與排出含菌培養(yǎng)物的速度相同，培養(yǎng)基
中某種必需營養(yǎng)物質(如某種氨基酸)的濃度控制在限定范圍，這樣
，系統(tǒng)內微生物生長速度由新鮮培養(yǎng)基加入系統(tǒng)的速度決定，最終
細胞濃度依賴于限制性營養(yǎng)物質的濃度。營養(yǎng)物質更新的速度以稀
釋率
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科