標(biāo)題：細(xì)菌的孢子是生長(zhǎng)在適當(dāng)瓊脂培養(yǎng)基的表面顯微鏡
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2017-1-7 20:20:22
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正文:
細(xì)菌的孢子是生長(zhǎng)在適當(dāng)瓊脂培養(yǎng)基的表面顯微鏡
驗(yàn)菌懸液的制備
給定菌種的細(xì)胞孢子的耐熱性是隨產(chǎn)生孢子培養(yǎng)基的性質(zhì)和溫
度而定�！悴捎锰峁┻m當(dāng)?shù)臈l件，以獲得產(chǎn)生耐熱性最高的孢子
。專性厭氧菌的最好孢子通常是在最低的保溫培養(yǎng)溫度下取得，此
時(shí)正是處于營(yíng)養(yǎng)體茁壯生長(zhǎng)階段。對(duì)芽孢桿菌屬來說，耐熱性最高
的孢子一般是在最高保溫培養(yǎng)溫度而取得，此時(shí)正是處于營(yíng)養(yǎng)體茁
壯生長(zhǎng)階段。
孢子的產(chǎn)生和收集
孢子良好發(fā)芽所需要的營(yíng)養(yǎng)條件往往與良好營(yíng)養(yǎng)體生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)條
件不同，因此，一些培養(yǎng)基可激勵(lì)營(yíng)養(yǎng)體良好地生長(zhǎng)，但孢子在這
些培養(yǎng)基上發(fā)芽卻很差。
專性需氧菌和兼性厭氧菌
這些細(xì)菌的孢子是生長(zhǎng)在適當(dāng)瓊脂培養(yǎng)基的表面。下面介紹一種
廣泛采用的方法。瓊脂斜面培養(yǎng)試管用試驗(yàn)菌生長(zhǎng)活潑的培養(yǎng)物接
種。然后升至適當(dāng)溫度保溫培養(yǎng)2～4天。當(dāng)鏡檢出現(xiàn)高的成熟孢子
時(shí)，則從保溫培養(yǎng)箱取出斜面培養(yǎng)物并把表面生長(zhǎng)物懸浮在無菌水
中。為了懸浮生長(zhǎng)物，每管要加3毫升的無菌水。同時(shí)用無菌接種
環(huán)把生長(zhǎng)物從表面刮下，懸浮于水中。后從許多斜面培養(yǎng)基將培養(yǎng)
物收集于無菌的螺旋蓋稀釋瓶中，而成為懸液。然后將懸液在80℃
加熱20分鐘，以破壞營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，并活化孢子，以促進(jìn)發(fā)芽。這種加
熱的懸液用于瓊脂斜面培養(yǎng)瓶的接種，以供大量生產(chǎn)孢子。
用容量150毫升的螺旋蓋瓶作為斜面培養(yǎng)瓶是較方便的，如果
需要，也可采用更大的或較小的瓶子。當(dāng)采用150毫升的瓶子時(shí)，
則每瓶裝50毫升瓊脂，并在121℃的壓熱器中加熱殺菌20分鐘，熱
殺菌后，把瓶子斜放以獲得最大的瓊脂表面。
每瓶接入2毫升經(jīng)加熱的孢子懸液，其制備法如上所述。然后
把每個(gè)瓶子前前后后地傾斜，直至接種物覆蓋全表面。接種過的瓶
子在適當(dāng)溫度下保溫培養(yǎng)，直至生長(zhǎng)與發(fā)芽完成(保溫培養(yǎng)時(shí)，瓶
子斜放成大約40。角，以便過量的接種物與冷凝水集中于瓶底)。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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