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標(biāo)題:細(xì)胞通過冷凍和在液氮中儲存,可被長期保存

信息分類:站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時間:2016-12-26 12:50:46 將本頁加入收藏

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正文:

細(xì)胞通過冷凍和在液氮中儲存,可被長期保存

  冷藏 

  通過冷凍和在液氮中儲存,細(xì)胞可被長期保存。影響細(xì)胞凍存成功
與否的重要因素包括凍存速率、冷凍保護(hù)劑的類型和濃度及細(xì)胞濃度。
盡管采用程序控制的細(xì)胞冷凍儀能取得最佳的效果,但使用其他方法也
可控制凍存速率。例如采用一個厚壁的聚苯乙烯盒,放置于一80℃冰箱
中,或放在一個可放人液氮細(xì)胞庫頸口的特殊裝置中,將細(xì)胞保持在氣
相中,使其慢慢降溫。然而這些方法不能像程序降溫儀那樣在凍存細(xì)胞
復(fù)蘇時獲得較高的存活率。避免細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成很關(guān)鍵,可以通過以
下幾種方法將其發(fā)生率減到最低,包括加入冷凍保護(hù)劑[如二甲基亞砜
或者甘油]、增大血清濃度、大量的細(xì)胞數(shù)和緩慢降溫。對于大多數(shù)哺
乳類動物細(xì)胞,最適降溫速率為一1℃/min。最常用的冷凍保護(hù)劑是10
%(體積分?jǐn)?shù))二甲基亞砜,這里的實(shí)驗(yàn)方案概括性地描述了它的用法,
但對于某些細(xì)胞它可能是有毒的(注:二甲基亞砜是一種極性溶劑,可
與溶解其中的任何物質(zhì)一起滲透人體皮膚,處理二甲基亞砜時要小心,
并戴上防護(hù)手套)。

  細(xì)胞復(fù)蘇方法也很關(guān)鍵,應(yīng)避免滲透沖擊。凍存細(xì)胞應(yīng)快速融化至
37℃,在培養(yǎng)基中緩慢稀釋。











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