標(biāo)題：懸浮培養(yǎng)的細胞傳代生物實驗圖像顯微鏡
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2016-12-24 1:09:32
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正文:
懸浮培養(yǎng)的細胞傳代
1．每2～3天后細胞生長密集，輕輕地將懸液培養(yǎng)的細胞從孵育箱
中取出而不要搖動
它，此時細胞沉降在瓶的底部。去掉1／3的舊液，加入等量的預(yù)
熱培養(yǎng)液。如果培
養(yǎng)液體積小于15ml，輕輕搖動培養(yǎng)瓶使細胞懸浮，然后水平放人
培養(yǎng)箱。
2．在不需要更換培養(yǎng)液的培養(yǎng)期內(nèi)，只需搖動培養(yǎng)瓶使
細胞懸浮，觀察培養(yǎng)液顏色的
變化，它直接顯示細胞生長代謝狀況。
3．當(dāng)細胞生長到2．5×10的3次方個／ml時進行傳代。從培養(yǎng)箱中取
出培養(yǎng)瓶，搖動以重懸細
胞。將一半的細胞懸液移入一個新培養(yǎng)瓶中，每瓶再補加預(yù)熱的
培養(yǎng)液7～lOml，
然后放人培養(yǎng)箱。
1．用70％乙醇清洗血細胞計數(shù)板表面及其蓋玻片，自來水輕微潤濕蓋
玻片的邊緣，并
將它緊貼在計數(shù)板的溝槽上，水平蓋住銀色計數(shù)區(qū)。
2．對于單層貼壁生長的細胞，用胰蛋白酶消化法使細胞從壁表面
分離下來。3．按需要將細胞稀釋成均勻的懸液，細胞團塊均需分
散。4．用一支無菌的巴氏滴管取細胞懸液并將其轉(zhuǎn)移至血細胞計
數(shù)板計數(shù)室的邊緣，用滴
管頭滴一滴在計數(shù)板蓋玻片的下方，使之充盈到第二個計數(shù)室。
5．開始計數(shù)前將計數(shù)板靜置幾分鐘，吸去多余的液體。用100×顯
微鏡觀看到一個大方
格狀的中心區(qū)。用手握式計數(shù)器計數(shù)四角及中心小方格內(nèi)的細胞
數(shù)，其中壓上線和
壓左線的細胞包含在內(nèi)。重復(fù)計數(shù)另一小室的細胞。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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