標(biāo)題：懸浮于液體薄膜中未染色的生物顆粒物質(zhì)玻璃化
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2016-12-4 2:30:05
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正文:
懸浮于液體薄膜中未染色的生物顆粒物質(zhì)玻璃化
玻璃化技術(shù)
將懸浮于液體薄膜中未染色的生物顆粒物質(zhì)玻璃化，輔以冰凍
電子顯微鏡術(shù)，是一種比負(fù)染色更優(yōu)越的結(jié)構(gòu)分析方法。冰凍電子
顯微術(shù)本身有一定的技術(shù)難度，但近年來(lái)這些問(wèn)題已經(jīng)在很大程度
上被克服了。須知那些未染色的玻璃化或者冰凍含水的標(biāo)本必須在
嚴(yán)格的低溫、低電子劑量下研究，同時(shí)必須應(yīng)用數(shù)字圖像處理，這
樣才能將電子顯微照片固有的對(duì)比度低的影像的結(jié)構(gòu)信息復(fù)原出來(lái)
。吸附于炭或平展于孔洞中的風(fēng)干的負(fù)染標(biāo)本，亦可以在葡萄糖
或海藻糖溶液存在時(shí)，于低溫下進(jìn)行研究。葡萄糖、海藻糖可以為
生物材料提供有效的保護(hù)，提高標(biāo)本移動(dòng)度或降低被支持碳材料吸
收，防止標(biāo)本扁平。這種低溫負(fù)染色技術(shù)某種程度上比未染色標(biāo)本
玻璃化操作簡(jiǎn)便，可以得到約為1．5nm的分辨率，但與近年來(lái)剛剛
發(fā)展起來(lái)的結(jié)合了玻璃化技術(shù)以及負(fù)染色技術(shù)二者優(yōu)點(diǎn)的冰凍負(fù)染
色技術(shù)相比，還是遜色了一些。
金屬投影和冰凍斷裂技術(shù)
負(fù)染色和玻璃化未染色標(biāo)本的制備都使用未經(jīng)固定的材料。而
鉑一碳或鎢一銥金屬投影技術(shù)要求預(yù)先固定生物材料，用蒸餾水透
析的方法完全除去固定液以及緩沖鹽，再吸附于云母、碳底物或重
懸于揮發(fā)性鹽，如醋酸銨、醋酸氫銨，常常還含有甘油的緩沖液后
需進(jìn)行洗滌。冰凍斷裂技術(shù)、金屬投影的分辨率一般低于負(fù)染色技
術(shù)以及未染色玻璃化材料的冰凍顯微術(shù)的分辨率，但是在冰凍干燥
、冰凍斷裂的樣本中，金屬在真空中蒸發(fā)的顆粒很勻稱，得到的結(jié)
果相當(dāng)好。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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