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標(biāo)題:生物分子的樣品-熒光顯微技術(shù)的原理和應(yīng)用

信息分類:站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時(shí)間:2014-6-12 19:10:19 將本頁(yè)加入收藏

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正文:

生物分子的樣品-熒光顯微技術(shù)的原理和應(yīng)用

    熒光光潛分析是單分子檢測(cè)的一種方法。單分子的熒光探測(cè)已經(jīng)成功地?cái)U(kuò)
展到了生物系統(tǒng)

單分子探測(cè)可被用于研究分子機(jī)動(dòng)原理、DNA轉(zhuǎn)錄、酶反應(yīng)、蛋白質(zhì)動(dòng)力和細(xì)胞
信號(hào).單分子探測(cè)與大量分子探測(cè)只能給出整體平均特性不同,它允許我們了
解單獨(dú)的生物分子的結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系。

    單分子探測(cè)用熒光對(duì)生物分子或生物高聚物進(jìn)行標(biāo)記。一個(gè)理想的選擇是
量子效應(yīng)接近于I的熒光標(biāo)記,這樣能得到最大的激發(fā)輻射。最先
進(jìn)的光電子探測(cè)系統(tǒng)(轉(zhuǎn)換單光子成為電信號(hào))已經(jīng)能達(dá)到單光子探測(cè)的極限,
從而極大地促進(jìn)了這一領(lǐng)域的發(fā)展。需要指出的是,單分子探測(cè)并不總是指對(duì)
孤立的單個(gè)分子的觀測(cè).其觀測(cè)一般用以下兩種方法:

    1.在稀釋極限下探測(cè)只含有一個(gè)分子或生物分子的樣品。
    2.探測(cè)結(jié)合到一個(gè)可以觀測(cè)和跟蹤的精細(xì)微球上的單分子。
    可以用一種玻璃顯微操作針來對(duì)這些生物分子進(jìn)行控制。而很多研究是用
光鑷捕獲連接單分子的微球。

    用于單光子探測(cè)的熒光探測(cè)方法還有:熒光壽命、雙光子激發(fā)、極化各向異
性和熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET).單分子熒光壽命測(cè)量借助了時(shí)間關(guān)聯(lián)單光子
檢測(cè)技術(shù)及其應(yīng)用(( Lee等,2001)。顯微技術(shù),如共聚焦顯微鏡和近紅外顯微
鏡,提供了染色細(xì)胞或單細(xì)胞聚合體的成像能力,











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