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正文:
光波長不同折射率也不同-為何
熒光顯微鏡比普通光鏡分辨率高
Stokes 1852 年發(fā)現(xiàn)有些物質(zhì)在短光波的照射下,物質(zhì)本身能放
射出一種比激發(fā)光波長較長的光波,他把這種光稱為
熒光。Wood在1
903 年設(shè)計了一種能吸收可見光和允許紫外光通過的濾片。在此基礎(chǔ)
上,Reichert 1911 年設(shè)計了第一臺
熒光顯微鏡。熒光
顯微鏡制成后,
由于人和動物組織的自發(fā)熒光很弱,當時熒光技術(shù)在醫(yī)學中的應(yīng)用仍
不滿意。
haitinger 1935年發(fā)現(xiàn)用非常稀薄的有機色素溶濃處理組織后,
可使標本的熒光亮度增強,從而可以觀察組織的續(xù)發(fā)性熒光。
以后,由于熒光方法和熒光裝置的改進,特別是熒光抗體方法的
建立及激發(fā)光源和濾片系統(tǒng)的發(fā)展,使熒光顯微鏡技術(shù)在細胞學、微
生物學、免疫學、病理學和臨床診斷方面得到了廣泛的應(yīng)用。
光,實質(zhì)上是物質(zhì)的原子和分子向外輻射的、具有一定波長和頻
率的能量。即光是能量的輻射形式,它是一種可見的電磁波。光有波
動性和量子性。波動性表現(xiàn)為光有反射、折射、繞射和千射等現(xiàn)象。
量子性表現(xiàn)為原子和分子輻射能量時,是以一連串微粒子形式進
行的,這種微粒子稱為光子(光量子)。
的光具有不同的顏色,即光的波長不同,光的顏色也不同。
而光波的振幅決定光的強度,振幅越大,光的亮度越強,振幅越
小,光的亮度越弱。此外,不同波長或不同頻率的光,具有不同的能
量,波長短(頻率高)的光,其光量子的能量大,波長長(頻率低)
的光,其光量子的能量小。
光的波長不同,其折射率亦不同。波長越長,折射率越小;波長
越短,折射率越大。因此,當一束平行白光通過棱鏡后,由于組成白
光的七色光的波長不同,它們的折射率各異,而被分散為紅、橙、黃、
綠、青、藍、紫七色光。紅光的波長最長(800 毫微米,nm),折射
率最小。
紫光的波長最短(400 毫微米),折射率最大。
波長長于800 毫微米的紅外光和短于400 毫微米的紫外光均為非
可見光。
光進入某些物質(zhì)后,部分或全部光能可被物質(zhì)的分子或原子所吸
收。物質(zhì)從外部吸收能量后,進入新的狀態(tài),稱為“激發(fā)態(tài)”。
當物質(zhì)從激發(fā)態(tài)回到原來的基態(tài)時,能以電磁輻射的形式放出所
吸收的能量,這種現(xiàn)象叫作“發(fā)光”。有些物質(zhì)由激發(fā)態(tài)回到原來的
基態(tài)時,不是以電磁輻射的形式,而是以其它形式(如以熱能的形式)
放出所吸收的能量,這種物質(zhì)不發(fā)光。此外,必須強調(diào)指出,光
的吸收具有高度選擇性,即一定能量的光量子輻射,只能被一定結(jié)構(gòu)
的物質(zhì)分子所吸收。
例如,石英玻璃對可見光幾乎不吸收,而對紅外光有強烈的吸收
作用。
利用物質(zhì)對光吸收的高度選擇性,可制成各種濾片,使之吸收一
定波長范圍的光,而允許特定波長的光通過,作為熒光顯微鏡中的激
發(fā)濾片和阻斷濾片。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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