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標題:光波長不同折射率也不同-為何熒光顯微鏡比普通光鏡分辨率高

信息分類:站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時間:2014-4-17 12:30:59 將本頁加入收藏

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正文:

光波長不同折射率也不同-為何熒光顯微鏡比普通光鏡分辨率高

  Stokes 1852 年發(fā)現(xiàn)有些物質(zhì)在短光波的照射下,物質(zhì)本身能放
射出一種比激發(fā)光波長較長的光波,他把這種光稱為熒光。Wood在1
903 年設(shè)計了一種能吸收可見光和允許紫外光通過的濾片。在此基礎(chǔ)
上,Reichert 1911 年設(shè)計了第一臺熒光顯微鏡。熒光顯微鏡制成后,
由于人和動物組織的自發(fā)熒光很弱,當時熒光技術(shù)在醫(yī)學中的應(yīng)用仍
不滿意。
    haitinger 1935年發(fā)現(xiàn)用非常稀薄的有機色素溶濃處理組織后,
可使標本的熒光亮度增強,從而可以觀察組織的續(xù)發(fā)性熒光。
    以后,由于熒光方法和熒光裝置的改進,特別是熒光抗體方法的
建立及激發(fā)光源和濾片系統(tǒng)的發(fā)展,使熒光顯微鏡技術(shù)在細胞學、微
生物學、免疫學、病理學和臨床診斷方面得到了廣泛的應(yīng)用。

    光,實質(zhì)上是物質(zhì)的原子和分子向外輻射的、具有一定波長和頻
率的能量。即光是能量的輻射形式,它是一種可見的電磁波。光有波
動性和量子性。波動性表現(xiàn)為光有反射、折射、繞射和千射等現(xiàn)象。
    量子性表現(xiàn)為原子和分子輻射能量時,是以一連串微粒子形式進
行的,這種微粒子稱為光子(光量子)。
    的光具有不同的顏色,即光的波長不同,光的顏色也不同。
    而光波的振幅決定光的強度,振幅越大,光的亮度越強,振幅越
小,光的亮度越弱。此外,不同波長或不同頻率的光,具有不同的能
量,波長短(頻率高)的光,其光量子的能量大,波長長(頻率低)
的光,其光量子的能量小。

    光的波長不同,其折射率亦不同。波長越長,折射率越小;波長
越短,折射率越大。因此,當一束平行白光通過棱鏡后,由于組成白
光的七色光的波長不同,它們的折射率各異,而被分散為紅、橙、黃、
綠、青、藍、紫七色光。紅光的波長最長(800 毫微米,nm),折射
率最小。

    紫光的波長最短(400 毫微米),折射率最大。
    波長長于800 毫微米的紅外光和短于400 毫微米的紫外光均為非
可見光。
    光進入某些物質(zhì)后,部分或全部光能可被物質(zhì)的分子或原子所吸
收。物質(zhì)從外部吸收能量后,進入新的狀態(tài),稱為“激發(fā)態(tài)”。
    當物質(zhì)從激發(fā)態(tài)回到原來的基態(tài)時,能以電磁輻射的形式放出所
吸收的能量,這種現(xiàn)象叫作“發(fā)光”。有些物質(zhì)由激發(fā)態(tài)回到原來的
基態(tài)時,不是以電磁輻射的形式,而是以其它形式(如以熱能的形式)
    放出所吸收的能量,這種物質(zhì)不發(fā)光。此外,必須強調(diào)指出,光
的吸收具有高度選擇性,即一定能量的光量子輻射,只能被一定結(jié)構(gòu)
的物質(zhì)分子所吸收。
    例如,石英玻璃對可見光幾乎不吸收,而對紅外光有強烈的吸收
作用。
    利用物質(zhì)對光吸收的高度選擇性,可制成各種濾片,使之吸收一
定波長范圍的光,而允許特定波長的光通過,作為熒光顯微鏡中的激
發(fā)濾片和阻斷濾片。











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