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正文:
實(shí)驗(yàn)中使細(xì)菌細(xì)胞著色后便于
顯微鏡下觀察
負(fù)染色與簡(jiǎn)單染色的對(duì)比
一、目的:比較負(fù)染色與簡(jiǎn)單染色細(xì)胞的差別。
二、原理:
(1)負(fù)染色為例:細(xì)菌若與酸性染料(苯胺黑Nigrosine)發(fā)色團(tuán)離子接觸因與細(xì)胞膜磷酸根帶陰
電荷相斥無(wú)法于細(xì)胞形成明顯顏色,僅細(xì)胞外圍背景著色(○-○-相斥)。
(2)簡(jiǎn)單染色為例:細(xì)菌細(xì)胞膜的磷酸根含有大量的陰電荷而包圍于細(xì)菌細(xì)胞的外圍,故能與
鹽基性染料的發(fā)色團(tuán)離子(帶陽(yáng)電荷)結(jié)合而使細(xì)菌細(xì)胞著色,使細(xì)菌細(xì)胞與周圍的介質(zhì)顏
色鮮明利于觀察。
三、材料:
1.顯微鏡 2.拭鏡紙 3.洋杉油 4.二甲苯 5.酒精燈 6.載玻片 7.試管架 8.蒸餾水 9.95%酒精
10.接種環(huán)11.染色盤 12.玻片夾13.鑷子14.染劑:○1苯胺黑○2結(jié)晶紫
15.菌種:Pseudomonas 假單胞桿菌
四、方法:
(1)負(fù)染色:二片slide 洗凈烘干備用→滴苯胺黑→取菌液與苯胺黑涂開(kāi)→取另一片slide 平鋪
均開(kāi)→自然風(fēng)干→觀察→畫圖并紀(jì)錄
(2)簡(jiǎn)單染色:一片slide 洗凈烘干備用→無(wú)菌取菌于slide 涂開(kāi)→烘烤固定→結(jié)晶紫染劑
(○+染色)→背面水洗→試干→觀察→畫圖并紀(jì)錄
(1)染劑(dye)種類:○1帶○-電荷染劑+○-
金屬離子Na+、K+→酸性染劑(acidic dyes)
○2帶○+電荷染劑+○-酸根離子Cl-、SO4
2-→堿性染劑 (basic dyes)
(2)印第安墨水(Indian Ink)、苯胺黑(Nigrosine)、結(jié)晶紫(Crystal videt)
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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