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標(biāo)題:標(biāo)本制備流程之檢體染色步驟!金相顯微鏡哪有賣?

信息分類:站內(nèi)新聞   作者:yiyi發(fā)布   時(shí)間:2012-5-30 0:45:18 將本頁加入收藏

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標(biāo)本制備流程之檢體染色步驟!金相顯微鏡哪有賣?
  很多種,視需要而定。一般常規(guī)的染色為 H & E,量大時(shí)用染色機(jī)自動(dòng)進(jìn)行。由與染色時(shí)使用的染料多為水溶性,無法進(jìn)入蠟中,因此在染色前玻片上的組織必須經(jīng)過 rehydrate 的過程方能染上,步驟順序與先前的脫水正好相反,一步步地?fù)Q回去,這些包括在染色機(jī)的功能里頭。
  H & E 的 H 是為 hematoxylin,事實(shí)上不是真的堿(需要媒染劑,并且不會(huì)在后續(xù)染色中脫落),不過染色結(jié)果卻類似于堿(帶正電)會(huì)染上組織中酸性的部分,呈深藍(lán)色,是水溶性的染料;而 E 是 eosin,它是一種酸(帶負(fù)電),會(huì)染上組織中堿性的部分,是紅色的,是溶于酒精的染料,因此在染完 hematoxylin 后要再次脫水,才染 eosin。染料的酸堿與其顏色無關(guān)。組織中可染上堿性染料的基團(tuán)(帶正電)包括碳酸基(羧基)、磷酸基與硫酸基,三者與堿結(jié)合的能力隨當(dāng)下 pH 而改變。組織內(nèi)的有些物質(zhì)──比如軟骨基質(zhì)、肝素顆粒,或者粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)──會(huì)對(duì)一些堿性染料產(chǎn)生“異染色(metachromasia)”的效果,這是因這些位置含有超多的負(fù)電,讓吸引的染料產(chǎn)生雙或多聚體的聚合,而聚合之后的顏色與原本不同,比如原本是藍(lán)卻染成紅或紫。
  而與堿性染料不同,影響其與組織結(jié)合的因素不只是電荷而已,不同的酸性染料可有不同的染色效果。因此可以不同之酸性染料反覆染色,制造顏色疊加的效果,比如 Mallory staining 就用了三種酸性染料:aniline blue、acid fuchsin、orange G。不同堿性染料偶爾亦可重複使用,但應(yīng)用范圍遠(yuǎn)不及酸性染料廣。
  染完色后再經(jīng) xylene 置換,以非水性的封片膠與蓋玻片封好,才是能看的玻片。封片的動(dòng)作在大量時(shí)有封片機(jī),小量時(shí)則人工完成。而在這之后,才是真正的鏡檢。











出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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