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微孢子蟲(chóng)病診斷方法-一級(jí)確定診斷抹片標(biāo)本顯微鏡鏡檢！

一級(jí)初步診斷：
輕度感染時(shí)因食慾及病變均不明顯，又不易致死，故不易察覺(jué)、診斷。但若香魚(yú)之皮膚、鰭、肌肉、鰓、腹腔內(nèi)各臟器之漿膜及脂肪組織見(jiàn)散發(fā)或密發(fā)之乳白色結(jié)節(jié)樣異物瘤，可從其內(nèi)容物之抹片標(biāo)本檢出橢圓或卵圓形之單一極囊、極核微孢子蟲(chóng)，大小為5.0-6.1μm×2.0-2.6μm，極絲長(zhǎng)約100μm。

二級(jí)初步診斷：目前魚(yú)類(lèi)微孢子蟲(chóng)尚無(wú)體外培養(yǎng)的方法。

三級(jí)初步診斷：目前尚無(wú)可應(yīng)用之方法。

一級(jí)確定診斷：
由發(fā)病魚(yú)體所產(chǎn)生的外表或臟器內(nèi)之異物瘤，可從其抹片標(biāo)本顯微鏡鏡檢，有些研究者應(yīng)用（kokoskin et al. 1994; Ryan et al. 1993）Chromotrope染色法而加以修改縮短染色時(shí)間，增加孢子與背景的對(duì)照，如Hot Gram-Chromotrope染色法，可將孢子染成粉紅色。
再則可應(yīng)用穿透式電子顯微鏡觀察孢子形態(tài)，其細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有粒線體、過(guò)氧化物酶體、典型扁平囊狀高爾基體，但具有完整的細(xì)胞核，是比較原始的真核生物，同時(shí)利用微孢子蟲(chóng)之超顯微結(jié)構(gòu)，依據(jù)超顯微結(jié)構(gòu)（如極絲纏繞的圈數(shù)）可以基本確立微孢子蟲(chóng)的種類(lèi)。

二級(jí)確定診斷：
目前魚(yú)類(lèi)微孢子蟲(chóng)尚無(wú)血清型分類(lèi)的依據(jù)；唯可應(yīng)用間接免疫螢先抗體法或酵素免疫吸附法（ELISA）來(lái)檢查宿主血清抗體的相對(duì)水平。

三級(jí)確定診斷：
依據(jù)微孢子蟲(chóng)之SSU和LSU rRNA基因序列以及它們之間的間隔序列而設(shè)計(jì)的特異性PCR引物（primers），可以用來(lái)檢測(cè)和鑑定微孢子蟲(chóng)的種類(lèi)，但研究的對(duì)象均偏重于感染人的微孢子蟲(chóng)，如：E. bieneusi、E. cuniculi、E. hellem、E. intestinalis。至于魚(yú)類(lèi)微孢子蟲(chóng)；Docker et al.（1997, R）根據(jù)rRNA序列設(shè)計(jì)一套引物評(píng)價(jià)PCR技術(shù)檢測(cè)大鱗大麻哈魚(yú)感染Loma salmonae的靈敏性和特異性，發(fā)現(xiàn)該技術(shù)能檢測(cè)到相當(dāng)于一個(gè)孢子的DNA量。Georgiadis et al.（1998）現(xiàn)場(chǎng)評(píng)價(jià)巢式PCR（Nested-PCR）對(duì)檢測(cè)感染Nucleospora salmonis之虹鱒的靈敏性和特異性，分別達(dá)到99.99%及99.87%。Lee & Yokoyama（2000）比較了幾種檢測(cè)方法，發(fā)現(xiàn)原位雜交法（in situ hybridization, ISH）檢測(cè)香魚(yú)">香魚(yú)微孢子蟲(chóng)（Glugea plecoglossi）感染虹鱒之靈敏度高，可以檢測(cè)到前孢子期，唯上述這些方法，均偏于實(shí)驗(yàn)階段，尚未開(kāi)發(fā)擴(kuò)展應(yīng)用到臨床檢測(cè)等相關(guān)工作。