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正文:

顯微鏡下去除植物細胞的細胞壁然后觀察此圓球形的原生質體

本文亦介紹細胞的基因轉殖的概念

本文章是讓學生利用酵素去除植物細胞的細胞壁，然后觀察此圓球形的原生質體（即植物細胞去除細胞壁），
學生可看到去除細胞壁后，植物的細胞的確有細胞膜存在。

另外，本文亦介紹''細胞的基因轉殖''的概念。也就是，將外來的DNA插入細胞內(nèi)。已被轉殖的細胞有細菌、酵母菌、動物細胞以及植物細胞。不論轉殖任何形式的細胞，細胞膜以及細胞壁或兩者其中之一，必定要被穿透，然而卻不能破壞到細胞。因此各種的技術被發(fā)展用來轉殖不同形式的細胞，且大部份這些技術的機制，仍不是完全被了解的。一些植物可藉由Agrobacterium tumefaciens做為載體來轉殖。然而，并非所有植物都能如此做，因此直接將DNA轉殖是另一個方法。

以植物為例來說，在將DNA直接穿透細胞膜之前，首先決定性的步驟是先要移除其細胞壁。因此當分子生物學家準備要被轉殖的各種形式植物，尤其是茄屬植物（Solanacea）時，會先分離其原生質體。原生質體產(chǎn)生后，便可使用電破法（electroporation）或PEG法（polyethylene glycol）將DNA穿透進入細胞膜。至于DNA的微注射法（microinjection）則較少用。原生質體也可以用來做''原生質體融合''以產(chǎn)生溷種（hybride），但很少成功。來自不同種間，分別處理過的原生質體，可融合在一起，而可應用在細胞的雜交�！咀ⅲ耗壳霸孱惖匿惴N十分地成功】

下列簡單的實驗是讓學生制備原生質體以便觀察，然而原生質體也可用來做真正的轉殖或癒合組織的誘導及組織誘導的計劃。但這些計劃的步驟不包括在這篇文章中。

學習對象：

植物生物學的介紹

需要花費的時間：

兩天，每天30分鐘（作為原生質體的制備和觀察用）。額外的活動、討論、應用則將需要花更多的時間。

消耗性材料：

    * 新鮮的波菜葉（spinach）、煙草（Nicotiana rustica）、或喇叭花的葉子（petunia leaf）、或大型綠藻（Green Macroalgae）【注：藻類原生質體制備，其滲透壓稍有不同】

    * 培養(yǎng)皿（一組一個）

    * parafilm或膠帶，用來封住培養(yǎng)皿

設備：

    * 鑷子（一組一對）

    * 針或大頭針（一組兩支）

    * 15毫升試管或小體積的燒杯

    * 有刻度的量筒（50ml）（全班幾支）

    * 解剖顯微鏡或光學顯微鏡

    * 寬口的微量吸管（10ml）及安全吸球

    * 載玻片和一般的蓋玻片--剪刀用來將葉子切成正方

化學藥品：

    * 緩沖溶液（每組10ml）

    * 甘露醣醇（mannitol），作為緩沖溶液用

    * 軟化酵素（macerase）（每組100mg）

    * 纖維酵素（cellulysin）（每組200mg）

出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科